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热点新闻:雨山区设备校验中心示范项目

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  • 更新时间:2025-05-29 22:02:47 ip归属地:马鞍山,天气:晴,温度:16-29 浏览次数:6
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此参数对于采用负反应分析酶活性的方法甚为重要,下面以丙氨酸氨基转移酶为例简述设置MIN-OD的步骤,选择一份高活性酶的混合血清,用生理盐水稀释,得到一组从低浓度至高浓度的丙氨酸氨基转移酶溶液;把这一组溶液按仪器设定的程序进行测定,并打印出反应曲线;从曲线中可以发现当酶活力达到一定临界浓度时,该临界浓度的反应曲线在连续监测时间内成线性,但是在监测时间后成非线性,即连续监测时间的后一个读数点正好是线性与非线性的临界点,所以该点的吸光度是在连续监测时间内酶促反应没有发生底物耗尽时所能达到的小吸光度。
  当酶活力高于上述临界浓度时,反应曲线在连续监测期内已不呈线性反应,有些仪器自动选择弹性速率功能,能自动选择反应曲线上连续监测期内仍呈线性的吸光度数据计算结果,使酶活性测定的线性范围得以扩大,可以减少稀释及重测次数降低成本。试剂吸光度上限下限试剂吸光度上限为正向反应用,可参考试剂盒说明书数值折算成所用比色杯的光径。如试剂盒要求上限为,比色杯光径cm,则试剂吸光度上限设置为。试剂吸光度下限为负向反应用,设置法同试剂吸光度上限。
  每种试剂都有一定的空白吸光度范围,试剂空白吸光度的改变往往提示着该试剂的变质,此时应更换合格试剂。线性范围试剂盒的线性范围与试剂质量反应时试剂/样品比有关,应实测试剂盒的线性范围。当样品浓度低于线性下限应增加样品量重测,而高于线性上限则应稀释后重测。使用任何一种方法测定某待测物时,待测物都有一个可测定的浓度或活性范围,样品结果若超过此范围,仪器将显示测定结果超过线性范围的提示,多数分析仪会自动将样品减量或增量重新测定。
  校正方法仪器内的设置的校正方法一般包含二点校正多点校正非线性校正等。二点校正是指用一个浓度的标准品和一个试剂空白进行校正的方法,该法要求反应必须符合朗伯-比尔定律,即标准曲线呈直线。多点校正是多个具有浓度梯度的标准品用非线性法进行校正,适用于标准曲线呈各种曲线形式的项目,如多数的免疫浊度法。非线性校正包括对数校正指数校正量程法校正等,标准曲线呈对数或指数曲线特征的项目可选择所对应的方法校正,量程法则是根据标准曲线上每两点间浓度与吸光度的关系计算待测物的浓度。

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