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孵育时间选择终点法时设置,在一点终点法是样品与试剂混匀开始至反应终点为止的时间,在两点终点法是个吸光度选择点开始至第二个吸光度选择点为止的时间。在设置孵育时间时,有些分析方法要特别注意,如选择溴甲酚绿法测定血清白蛋白时,由于血清中α-球蛋白转铁蛋白等也可与溴甲酚绿呈色,尽管其反应速率较白蛋白为慢,但是实际上当血清与白蛋白混合时,“慢反应”已经发生,因此为减少非特异性结合反应,应在溴甲酚绿与血清混合后s读取吸光度。
当选择酶法的反应测定葡萄糖总胆固醇甘油三酯时,由于℃酶反应较慢,因此必须测定这些酶试剂反应达到终点的时间,自动分析仪用试剂盒一般可以在全部加样后分钟内反应完全,所以应选择分析仪的大反应时间。延迟时间选择连续监测法或两点终点法时设置,即在样品与反应试剂第二试剂混匀开始至个吸光度选择点之间的时间。在连续监测法过程中,当酶与底物混合后需要一定的时间让酶,直至线性反应期才能开始监测,有的项目需要用工具酶将内源性代谢产物耗尽,干扰。
一般单试剂法只需要s,常用项目中谷氨酸氨基转移酶天冬氨酸氨基转移酶需要特别注意,但是对于双底物反应或需要辅酶参与者,通常为-min。监测时间酶促反应延滞期后,在过量底物的存在下,反应速率加快并达到稳定的阶段,即酶促反应以恒定的速率进行,不受底物浓度的影响,这段时间称为线性反应期或零级反应期,自动生化分析仪的监测时间即为此期。连续监测法在零级反应期至少应监测至少点个,少于个不能称为连续监测法,因为不能计算线性度;监测时间过长则容易发生底物耗尽,可测范围变窄。
计算因子F值和实测F值用连续监测法进行酶活性测定时,不需作标准管或标准曲线,根据摩尔吸光系数很容易进行酶活性浓度的计算。先测定在线性范围内每分钟吸光度的变化,以代表酶活性浓度时,则可按下式进行计算式中V反应体系总体积ml;将mol换算成;摩尔吸光系数;v样品体积ml;L比色杯光径cm。当条件固定时,从理论上讲Vv和L均为固定值,ε值为常数,所以F值是恒定的。
批标准的原理及其组成交直流输出电压及输出容员的检定原理图校验装置的高压分压器及数字电压表交直流击穿电流的检定原理图校验装置的电流表时间控制器的检定原理图时间测试部分电磁计量器具遠标指南=:计U标准器及主要配套设备计址标准器名称型号测范闱不确定度或准确度等级或大允许误差制造厂及出厂编号检定或校准机构检定周期或复校间隔耐电压测试仪校验装《计标准考核复查申请书》一般使用A复印纸,采用计算机打印,如果用墨水笔填写,要求字迹工整清晰。相对标准不确定度结论用贝塞尔公式计算得出标准偏差,检定装置重复测扯交流和直流电压的标准偏差皆小于相应范围被检耐电压测试仪输出电压等级指数的,符合要求。第三章电硉计量器具遠标申请书和技术报告编写示例用此装咒重复测拭直流击穿电流。测扯条件温度,相对湿度直流测扯值测拭次数测址次数相对标准不确定度相对标准不确定度电磺计量器具建标指南交流测扯值测批次数测扯次数相对标准不确定度相对标准不确定度论用贝塞尔公式计算得出标准偏差,检定装置重复测批交流和直流电流的标准偏差皆小于相,符合要求。
第三章电硉计曼器具建标申请书和技术报告编写示例批标准的稳定性考核计拭标准的稳定性应小于计拭标准的扩展不确定度或大允许误差的值。标准器编号名义值上级法定计屈机构检定数据或自我对比数据/kV结论允许变化年年变差年变差年变差合格由以上数据可知,年变化均不大千允许变差,符合耐电压测试仪校验装笠的要求。电咱计量器具建标指南九检定或校准结果的测且不确定度评定l交流输出电压测扯不确定度的评定II测批方法依据《耐电压测试仪》,以耐电压测试仪校验装置为参考标准,采用直接测从法对耐电压测试仪交流输出压点进行检定。
测批模型被检定耐电压测试仪的输出实际值可表示为,式中校验装饮测址的耐电压测试仪的输出实际值;下述原因对校验装置电压测扯值的综合影响I)自上次校准以来,校验装趾电压值的漂移;值的影响;I标准不确定度分阰评定II输出实际值V易引入的标准不确定度U测试仪两者重复性的共同影响。进行次瓜复测扯,结果如下测批次数经计符后可得实验标准差次测扯平均值的标准不确定度为顶=其他因素对校验装置的影型耐电压测试仪校吩装罚的使用说明书没有分别给出每一种因素对电压测址的影响。
于是对于校准点,其不确定度为第三章电磁计量器具建标申请书和技术报告编写示例这些规定条件环境温度在校验装置的电源电压在V范围内;校验装置自上一次校准至今不超过年。由于这些条件均得到满足,并且校验装置的校准历史记录表明各项技术均为合格,故可以认为由这些因素的影响而产生的不础定度为kV,假定其满足矩形分布,则标准不确定度为相关性各输入批之间未发现有任何值得考虑的相关性,故认为相互独立。
标准不确定度分扯一览表符号估计值I概率分布矩形灵敏系数c,标准不确定度/kVI合成标准不确定度计算被测扯分布的估计由不确定度概算可知,共有两个不确定度分址。显然,由其他因素对校验装置的影响引入的不确定度是占优势的分批。由于该分布为矩形分布,故被测批应接近于矩形分布。扩展不确定度取k=,则扩展不确定度为确定度报告在条件下,被检定耐电压测试仪交流输出电压kV点输出实际值为kV,其相对扩展不确定度,满足要求。
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