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试剂量/样品量比值，不要为节省试剂而过分地减少试剂用量，因为在终点比色法中，缩小试剂量/样品量比值会降低线性范围，遇高浓度样本会因试剂量不足而使结果偏低。分析时间分析时间包括孵育时间延迟时间监测时间等，选择不同的分析方法应选择相应的分析时间。孵育时间选择终点法时设置，在一点终点法是样品与试剂混匀开始至反应终点为止的时间，在两点终点法是个吸光度选择点开始至第二个吸光度选择点为止的时间。在设置孵育时间时，有些分析方法要特别注意，如选择溴甲酚绿法测定血清白蛋白时，由于血清中α-球蛋白转铁蛋白等也可与溴甲酚绿呈色，尽管其反应速率较白蛋白为慢，但是实际上当血清与白蛋白混合时，“慢反应”已经发生，因此为减少非特异性结合反应，应在溴甲酚绿与血清混合后s读取吸光度。
当选择酶法的反应测定葡萄糖总胆固醇甘油三酯时，由于℃酶反应较慢，因此必须测定这些酶试剂反应达到终点的时间，自动分析仪用试剂盒一般可以在全部加样后分钟内反应完全，所以应选择分析仪的大反应时间。延迟时间选择连续监测法或两点终点法时设置，即在样品与反应试剂第二试剂混匀开始至个吸光度选择点之间的时间。在连续监测法过程中，当酶与底物混合后需要一定的时间让酶，直至线性反应期才能开始监测，有的项目需要用工具酶将内源性代谢产物耗尽，干扰。
一般单试剂法只需要s，常用项目中谷氨酸氨基转移酶天冬氨酸氨基转移酶需要特别注意，但是对于双底物反应或需要辅酶参与者，通常。监测时间酶促反应延滞期后，在过量底物的存在下，反应速率加快并达到稳定的阶段，即酶促反应以恒定的速率进行，不受底物浓度的影响，这段时间称为线性反应期或零级反应期，自动生化分析仪的监测时间即为此期。连续监测法在零级反应期至少应监测-s或至少点不能称为连续监测法，因为不能计算线性度；监测时间过长则容易发生底物耗尽，可测范围变窄。
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